Analiza cerebrospinalne tekočine (CSF) je močno orodje za izboljšanje odkrivanja različnih procesov, ki se pojavljajo v centralnem živčnem sistemu, kot so krvavitve, vnetja, okužbe, tumorji in druga klinična stanja. Poleg tega so serijske ocene spojin v cerebrospinalni tekočini (kot so hormoni, zdravila, nevrotransmiterji, biomarkerji, metaboliti in virusi) enako ključne tako v osnovnih kot v translacijskih raziskavah. Volumen cerebrospinalne tekočine v centralnem živčnem sistemu se ohranja stabilen z izločanjem in absorpcijo.
I. Operativni vidiki
CSF se običajno zbere prek cerebralnega ventrikla ali lumbalne punkcije. Lumbalna punkcija prinaša sorazmerno manjše tveganje zapletov pri primatih razen-človeka, ker je pri večini vrst mesto lumbalne punkcije oddaljeno od konca hrbtenjače. Potrebne so ustrezna anestezija in aseptične tehnike, vključno s pripravo mesta, kot je britje, in uporaba sterilnih materialov. Uporabljati je treba vsaj sterilne rokavice, brizge in igle, pri čemer je treba upoštevati sterilne kirurške zavese. Odvzem cerebrospinalne tekočine se običajno izvaja v bočnem ležečem položaju, v ležečem položaju na prsnici ali v sedečem položaju, kar izboljša dostop do možganskih prekatov ali poveča medvretenčni prostor z upogibom vratu ali hrbtenice. Velikost in dolžina izbrane igle morata biti primerni za vrsto in velikost ne-človeških primatov. Tehnike, oprema, potrošni material, ki se uporablja med postopkom, in perioperativna oskrba se razlikujejo glede na vrsto, raziskovalne cilje in želje kliničnega veterinarja.
Nekateri raziskovalni protokoli lahko zahtevajo neprekinjeno zbiranje CSF skozi čas ali zbiranje vzorcev CSF pri osebah, ki niso bili anestezirani. Za te protokole je mogoče doseči neprekinjeno zbiranje likvorja pri budnih opicah rezus z dolgotrajno{1}}vsajenimi katetri likvorja, povezanimi s podkožnimi zbiralnimi vrati.
Avtor si je po najboljših močeh prizadeval najti najnovejše reference v zvezi s skupnim volumnom CSF, omejitvami ali priporočili za duralne punkcije, pogostostjo odvzema, varnim volumnom odvzema in stopnjami obnavljanja CSF. Literatura o tem vidiku je omejena za večino primatov razen-človeka. Poleg tega se metode zbiranja razlikujejo, saj raziskave članov Non{3}}Human Primate Veterinary Association kažejo, da različne ustanove uspešno uporabljajo različne metode za zbiranje CSF. Zato avtor podaja premisleke in priporočila za zbiranje CSF na podlagi obstoječih najboljših dokazov.
Za referenco so prejšnje študije ugotovile, da je navidezni volumen CSF pri odraslih samcih opic rezus (8,0-10,6 kg) 10+/-0,06 ml, s hitrostjo pretoka CSF 0.018+/-0,003 ml/min. Hitrost tvorbe cerebrospinalne tekočine pri opicah rezus se giblje med 28,6–44,2 μl/min. Na tem področju so potrebne nadaljnje raziskave primatov razen človeka, da se olajša razvoj bolj poučnih priporočil.
II. Možni neželeni učinki
Čeprav so zapleti med zbiranjem cerebrospinalne tekočine pri ne-človeških primatih redki, lahko anatomske razlike in nepravilne ali neustrezne tehnične metode povzročijo poškodbe vzorca ali zaplete, kot so krvavitev, hernija, okužba, poškodba možganskega debla, hrbtenjače ali živčnih korenin in nelagodje živali. Čeprav so ti zapleti redki, lahko ogrozijo dobro počutje živali.
Zaradi tveganj, ki so vključena, mora CSF zbirati veterinar ali usposobljeno veterinarsko osebje. Pri neuspešnih poskusih odvzema CSF se lahko postopki razlikujejo. Običajna praksa je, da enemu posamezniku dovolimo do tri neuspešne poskuse. Po tretjem neuspešnem poskusu naj prevzame drug usposobljen posameznik. Če drugi posameznik po treh poskusih ne more odvzeti CSF, je treba poskuse prekiniti. Medtem bo žival prejela ustrezno protibolečinsko zdravljenje in si opomogla od anestezije. Sprememba zbiralnega mesta (npr. iz možganskih prekatov v ledveno) po neuspešnih poskusih pogosto privede do uspeha. Če pride do neuspešnega poskusa brez vodenja slikanja, lahko uporabite-namestitev igle s pomočjo fluoroskopije. Poleg povečanja stopnje uspešnosti lahko slikovno vodenje zmanjša tudi stopnjo travmatičnih vbodov.
Pooperativno spremljanje je treba nadaljevati, dokler se žival ne vrne v svojo kletko in lahko ohrani pokončno držo brez podpore. Spremljanje živali naj traja vsaj 24 ur oziroma po protokolu, ki ga potrdi Institucionalni odbor za oskrbo in uporabo živali (IACUC). Spremljanje mora vključevati ocene osnovnih fizioloških, vedenjskih in lokomotornih parametrov. Posebej je treba oceniti znake nevrološke disfunkcije, vključno z letargijo, depresijo, komo in znaki tiščanja glave, vendar ne omejeno nanje. Glavoboli in posledična intrakranialna hipotenzija po odvzemu CSF v humani medicini niso neobičajni. Ob upoštevanju tega možnega zapleta pri ne-človeških primatih je treba analgetično zdravljenje zagotoviti med operacijo in nadaljevati 2-3 dni po operaciji ali po potrebi na podlagi pooperativnih opazovanj, povezanih z vedenjem, povezanim z glavobolom ali bolečino v hrbtenici. Najučinkovitejši analgetični režim lahko vključuje celovito zdravljenje, ki se začne pred operacijo.
III. Premisleki IACUC in vodenje evidenc
IACUC mora biti seznanjen s postopki v zvezi z odvzemom CSF in vsemi možnimi zapleti ter jih pregledati vsaj enkrat letno. Vse pomembne informacije, kot so odmerki zdravil, predoperativne priprave, zbrane količine cerebrospinalne tekočine, pogostost zbiranja ter kratko- in dolgoročno- pooperativno okrevanje, je treba opisati v protokolu IACUC in ustrezno dokumentirati v medicinski kartoteki ali laboratorijskih dnevnikih.
Čeprav je cerebrospinalna tekočina lahko ključni podatek v raziskovalnih protokolih, lahko nepravilne tehnike zbiranja vplivajo na dobro počutje živali. Pri predložitvi protokolov je treba predložiti znanstveno utemeljitev števila in pogostosti odvzemov. Natančneje, IACUC bi moral natančno oceniti vsak predlog, ki vključuje zbiranje CSF, in upoštevati naslednje:
1. Ali je zbiranje CSF bistveno za doseganje znanstvenih ciljev, opisanih v protokolu?
2. Ali so na voljo alternativne metode in manj invazivne metode vrednotenja centralnega živčnega sistema (kot so tehnike slikanja) in če so, ali so bile upoštevane?
3. Ali so operaterji prejeli ustrezno usposabljanje in imajo zadostno znanje?
4. Ali bo zagotovljena ustrezna perioperativna anestezija in analgetiki? O načrtih za anestezijo in analgetike se je treba posvetovati z veterinarji za laboratorijske živali.
5. Ali zbrani volumen CSF upošteva starost in velikost živali?
6. Ali sta število in pogostost duralnih punkcij primerna za žival in ali je tveganje za zaplete zmanjšano na minimum? Če je del študije več zbiranj CSF, je treba določiti najdaljši čas zbiranja za vsako žival.
7. Ali je načrt pooperativnega spremljanja ustrezen?
8. Ali so bili upoštevani vsi možni pooperativni zapleti in ali so navedeni vsi razumni posegi, vključno z evtanazijo?
