1. Kaj vključujejo neklinične študije?
odgovor:Neklinični poskusi vključujejo farmakološke študije, teste splošne toksičnosti, toksikokinetike in neklinične farmakokinetične poskuse, teste reproduktivne toksičnosti, teste genotoksičnosti, rakotvornosti in druge teste (fototoksičnost, odvisnost, imunotoksičnost) itd. V primerih kombiniranega zdravljenja se lahko izvajajo tudi neklinične študije varnosti kombiniranega zdravljenja. Pri določenem visokem deležu (več kot 10 % celotne sistemske izpostavljenosti in raven izpostavljenosti v študijah na živalih je nižja od izpostavljenosti ljudi) bo morda treba izvesti neklinične varnostne študije presnovkov.
2. Kaj je namen neklinične ocene varnosti?
odgovor:Namen neklinične ocene varnosti na splošno vključuje pojasnitev značilnosti reakcije toksičnosti, povezane s ciljnimi organi, odvisnostjo od odmerka, razmerjem med izpostavljenostjo in potencialno reverzibilnostjo. Te informacije se lahko uporabijo za oceno varnega začetnega odmerka in razpona odmerkov za klinična preskušanja na ljudeh (kot je bilo že omenjeno, je treba NOAEL pridobiti v toksikoloških poskusih za izračun MRSD, največjega priporočenega začetnega odmerka) in za določitev indikatorjev kliničnega spremljanja za morebitne neželene učinke.
3. Katere neklinične študije so potrebne za prve-v-preskušanjih na ljudeh?
odgovor:Pri tem vprašanju je treba najprej razjasniti vrsto zdravila. ICH M3 (R2) se uporablja za običajne situacije pri razvoju zdravil in zagotavlja splošna vodilna načela. Za biološka zdravila je treba neklinične študije izvesti v skladu z zahtevami ICH S6.
⑴Farmakokinetika:Pred predložitvijo IND zadoščajo podatki o presnovi preskušanega izdelka pri različnih živalskih vrstah in podatki o presnovi in vitro pri ljudeh ter stopnja vezave na beljakovine v plazmi. Podatke o absorpciji, porazdelitvi, presnovi in vivo in izločanju je treba pripraviti pred obsežnimi-kliničnimi preskušanji (običajno 3. faza). Poskusi farmakokinetične absorpcije se na splošno izvajajo pri več vrstah pred predložitvijo IND in določitvijo PCC, da bi bolje razumeli farmakokinetične značilnosti zdravila pri različnih vrstah, čeprav to tukaj ni potrebno, kar je nekoliko čudno.
⑵Varnostna farmakologija:Vrednotenje učinkov na srčno-žilni, centralni živčni in dihalni sistem je treba zaključiti pred predložitvijo IND, ki je kombinacija standardnih varnostnih farmakoloških testov. Med kliničnimi preskušanji se lahko po potrebi izvedejo dodatni varnostni farmakološki poskusi.
⑶Toksičnost ponovnega odmerka:Na splošno se kratkotrajni-test kronične toksičnosti izvede na podlagi sheme zgodnjega odmerjanja IND. Če je treba obdobje odmerjanja pozneje podaljšati, je v podporo temu potreben dolgoročnejši-test kronične toksičnosti.
⑷Genotoksičnost:Z razmeroma nizkimi stroški je mogoče kombinacijo testa genotoksičnosti dokončati pred predložitvijo IND.
⑸Rakotvornost:Preskušanje rakotvornosti je treba zaključiti pred odobritvijo zdravila.
⑹Strupenost za razmnoževanje:Opazovanja in ocene reproduktivnega sistema je treba vključiti v preskuse toksičnosti pri ponavljajočih se odmerkih pred predložitvijo IND, da se predhodno oceni reproduktivna toksičnost, pri čemer zadošča stroga kontracepcija v kliničnih preskušanjih. Študije reproduktivne toksičnosti faze I/II je treba zaključiti pred-obsežnimi kliničnimi preskušanji, študije reproduktivne toksičnosti faze III pa je treba zaključiti pred odobritvijo.
⑺Fototoksičnost:Oceno fototoksičnosti je treba dokončati pred predložitvijo IND. Če je molarna absorpcija večja od 1000 M-1cm-1, velja, da obstaja tveganje za fototoksičnost, zato je treba pred obsežnimi kliničnimi preskušanji opraviti testiranje fototoksičnosti.
4. Kako je treba določiti odmerke v toksikoloških testih? Kako naj se izbere največji odmerek?
odgovor:Glede na »Načela tehničnih navodil za preskuse toksičnosti pri ponavljajočih se odmerkih zdravil«: »Načeloma morajo visoki odmerki povzročiti očitne toksične reakcije pri živalih, nizki odmerki morajo biti enakovredni ali višji od učinkovitega odmerka pri živalih ali klinični uporabi, srednji odmerki pa morajo biti nastavljeni med visokimi odmerki in nizkimi odmerki na podlagi toksičnega mehanizma in značilnosti, da se preuči razmerje toksičnosti med odmerkom-odzivom.«
Glede na visoke stroške toksikoloških testov je v praksi izvedba testa-določanja razpona odmerkov (DRF) z nekaj-nečloveškimi primati najbolj stroškovno-učinkovita in-prihranjujoča metoda. Odmerek za teste DRF je treba dodatno določiti na podlagi predhodnih varnostnih študij, izvedenih med zgodnjim določanjem PCC in farmakološkimi študijami. Številne ustanove zdaj izvajajo tudi teste akutne toksičnosti poleg testov DRF, ki niso -testi GLP, kot je navedeno v M3 (R2), po načelu 3R za zmanjšanje uporabe živali.
Za skupine z nizkimi, srednjimi in visokimi odmerki se običajno uporablja razmik 2-3-krat. Pri uradnih toksikoloških testih je idealna situacija, da lahko skupina z velikimi odmerki dokaže očitno toksičnost, skupine z nizkimi ali srednjimi odmerki pa se lahko uporabijo kot NOAEL.
Poleg tega za izbiro najvišjega odmerka M3 (R2) ponuja tudi standardne odgovore. Preprosto povedano, najvišji odmerek v toksikologiji bi moral biti bodisi največji tolerirani odmerek (MTD) ali največji izvedljivi odmerek (MFD, ki ga je mogoče razumeti kot največji odmerek, ki ga živali lahko prenesejo na podlagi lastnosti proizvoda in živali), ali pa mora doseči nasičenost izpostavljenosti ali pa mora biti raven izpostavljenosti dovolj visoka (doseči 50-kratni načrtovani klinični odmerek). Na splošno velja, da 1000 mg/kg/dan zadostuje, razen če predvideni klinični odmerek doseže 1 g/dan in raven izpostavljenosti 1000 mg/kg ne doseže 10-kratne ravni klinične izpostavljenosti; v tem primeru morate dodatno povečati odmerek na 10-kratno raven klinične izpostavljenosti ali 2000 mg/kg/dan ali MFD.
5. Katere študije v nekliničnih raziskavah varnosti morajo upoštevati GLP in katere ne?
odgovor:Farmakološkim in farmakokinetičnim študijam ni treba slediti GLP, medtem ko morajo študije farmakologije varnosti, genotoksičnosti, reproduktivne toksičnosti in toksičnosti pri ponavljajočih se odmerkih slediti GLP.
6. Kako dolgo trajajo neklinične študije toksičnosti pri ponovljenih odmerkih?
odgovor:Zahteve glede trajanja za podporo izvedbi kliničnega preskušanja in odobritve trga so različne in morajo biti specifične za obdobje odmerjanja v kliničnih preskušanjih. Na primer, za bolnike z multiplo sklerozo je minimalno načrtovano obdobje kliničnega preskušanja dve leti. Zato je pri vključevanju bolnikov z multiplo sklerozo v klinična preskušanja potrebna 6-mesečna študija kronične toksičnosti na glodalcih in 9-mesečna študija kronične toksičnosti ne-neglodalcev, kar zadostuje za odobritev trženja. Za ne-onkološka zdravila se 4-tedenska študija kronične toksičnosti običajno uporablja za podporo obdobju odmerjanja, ki ne presega 4 tednov za prva klinična preskušanja pri ljudeh.
7. Kako izbrati poskusne živali za neklinično oceno varnosti?
odgovor:Na splošno se uporabljata dve vrsti živali, pri čemer so prednostna izbira glodavci s podganami, prednostna izbira pa so ne{0}}glodavci s psi Beagle. Seveda je treba upoštevati tudi načela-analize specifičnih izdelkov. Za majhne molekule je treba pri izbiri vrste upoštevati predvsem presnovne značilnosti preskušanega izdelka pri živalih, ki so podobne ljudem. Lahko se sklicujete na "Analizo in identifikacijski test presnovkov preiskovanih produktov pri miših CD-1, podganah SD, psih beagle, opicah Cynomolgus in mikrosomih človeških jeter", pri čemer so izbrane vrste s presnovnimi značilnostmi, podobnimi ljudem, to je vrste s podobnimi količinami in vrstami metabolitov kot ljudje. Poleg tega mora biti izbrana vrsta občutljiva na preskušani izdelek. Na podlagi preteklih izkušenj so presnovne lastnosti zdravila z majhno molekulo pri psih pasme Beagle lahko podobne tistim pri ljudeh, vendar z nizko izpostavljenostjo.
